鉴别硝化细菌用什么培养基

“硝化细菌是一大类细菌的总称，它在地球的氮循环中其中十分重要的作用。

分为亚硝化细菌和硝化细菌两大类，亚硝化细菌可以把氨氮转换成亚硝酸盐，硝化细菌接着把硝酸盐转变成硝酸盐。硝酸盐最后变为气态氮。目前没有发现身兼亚硝化和消化于一身的硝化细菌。

硝化细菌分布广泛，如城市污水，味精厂的废水中有很多。取水样后要先用选择性培养基分离菌种，

常用的配方是：硫酸铵0.5g 氯化钠 0.3g 硫酸亚铁0.03g 磷酸二氢钠 1g 硫酸镁0.03g CaCl2 7.5g 蒸馏水 1000ml PH 7.5，固体培养基加5％琼脂硝化菌培养基亚硝酸钠 1g 硫酸镁0.03g 硫酸锰0.01g 磷酸氢二钾0.75g 无水碳酸钠 1g 磷酸二氢钠 0.25g 蒸馏水 1000ml PH 7.5，固体培养基加5％琼脂。

另外如果你要是用固体培养基倒置培养，可以适当多加些琼脂。亚硝酸盐有毒，使用时要当心。亚硝化细菌18分钟可繁殖一代，硝化细菌大约要15小时繁殖一代。一般3-5天就会出结果，乳白色的菌落。亚硝化细菌用格里斯试剂检测(出现红色)，硝化细菌用二苯胺检测（出现蓝色）。

然后还要根据你的用途进行定向培育。”

乳制品如何检验

GB/T 5009.33—1996

中华人民共和国国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法 Method for determination of nitrite and nitrate in foods GB/T 5009.33—1996 1 主题内容与适用范围本标准规定了食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定方法。本标准适用于食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定。亚硝酸酸盐方法检出限为1 mg/kg，硝酸盐方法检出限为1.4 mg/kg。第一篇格里斯试剂比色法（第一法）（一）亚硝酸盐测定 2 原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。 3 试剂实验用水为蒸馏水，试剂不加说明者，均匀分析纯试剂。 3．1 氯化铵缓冲液：1 L容量瓶中加入500 mL水，准确加入20.0 mL盐酸，振荡混匀，准确加入50 mL氢氧化铵，用水稀释至刻度。必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6～9.7。 3．2 硫酸锌溶液（0.42 mol/L）：称取120 g硫酸锌（ZnSO4·7H2O），用水溶解，并稀释至1 000 mL。 3．3 氢氧化钠溶液（20 g/L）：称取20 g氢氧化钠用水溶解，稀释至1 L。 3．4 对氨基苯磺酸溶液：称取10 g对氨基苯磺酸，溶于700 mL水和300 mL冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。 3．5 N-1-萘基乙二胺溶液（1 g/L）：称取0.1 g N-1-萘基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀释至100 mL，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。 3．6 显色剂：临用前将N-1-萘基乙二胺溶液（1 g/L）和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。 3．7 亚硝酸钠标准溶液：准确称取250.0 mg于硅胶干燥器中干燥24 h的亚硝酸钠，加水溶解移入500 mL容量瓶中，加100 mL氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。此溶液每毫升相当于500 μg的亚硝酸钠。 3．8 亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1.00 mL，置于100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0 μg亚硝酸钠。 4 仪器 4．1 小型粉碎机。 4．2 分光光度计。 5 操作方法 5．1 样品处理称取约10.00 g（粮食取5 g）经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70 mL

中华人民共和国卫生部 1996—06—19 批准 1996—09—01 实

1、乳品中掺淀粉、米汁的定性检测、乳品中掺淀粉、原理：牛乳中掺淀粉、米汁，通过碘溶液会发生颜色变化。原理：试剂：试剂：20%醋酸溶液。碘溶液：碘溶液：称取 4g 碘化钾，溶于适量水中，加 2g 碘，待碘完全溶化后，移入 100mL 容量瓶中，以水定容至刻度。操作方法：操作方法：取乳样 10mL 于试管中，加 0.5mL 碘试剂及 20%醋酸溶液，如牛乳中掺淀粉、米汁，则呈蓝色或蓝青色，如掺入糊精类，则为红紫色。 2、乳品中豆浆、豆饼水的检测、乳品中豆浆、原理：原理：牛乳中掺豆浆、豆饼水，通过碘溶液会发生颜色变化。试剂。碘溶液：称取 4g 碘化钾，溶于适量水中，加 2g 碘，待碘完全溶化后，移入 100mL 容量瓶中，以水定容至刻度。操作方法：操作方法：取乳样 10mL 于试管中，加 0.5mL 碘试剂，混匀，观察颜色变化。同时，做正常乳的对照试验。正常乳呈橙**，掺豆浆乳呈浅绿色。本法最低可以检出 5% 的豆浆。 3、掺尿素的检测[格里斯（Gruess）试剂定性法、掺尿素的检测格里斯格里斯（）试剂定性法]原理：原理：牛乳中加入 1%亚硝酸钠溶液及浓硫酸后，加入格里斯试剂会使掺尿素的牛乳出现特殊颜色。格里斯试剂：格里斯试剂：称取酒石酸 89g，对氨基苯磺酸 10g 及 ɑ－萘胺 1g，混合研磨成粉末，贮于棕色瓶中；浓硫酸；1%亚硝酸钠溶液。操作方法：操作方法：取乳样 3mL 于试管中，加 1%亚硝酸钠溶液及浓硫酸 1mL，摇匀，放置 5分钟，待泡沫消失后，加格里斯试剂 0.5g，摇匀，观察颜色变化，同时做正常乳 (超级女生)、食堂豆浆

对照试验。紫色为正常乳，本法为定性检测。 4、乳中掺防腐剂（水杨酸与苯甲酸）的检测方法——三氯化铁呈色反应定性法、乳中掺防腐剂（水杨酸与苯甲酸）的检测方法试剂：试剂：10%氢氧化钠溶液；盐酸；无水乙醚；无水硫酸钠；1＋1 氨水； 1%三氯化铁溶液；10%亚硝酸钾溶液；50%乙酸；10%硫酸铜溶液。操作方法：操作方法：取乳样 100mL 于锥形瓶中，加 10%氢氧化钠溶液 5mL，搅匀，再加 10% 硫酸铜溶液 10mL，搅匀，过滤。收集于分液漏斗中，加盐酸 5mL、乙醚 75mL，萃取。收集乙醚层于另一分液漏斗中，加水 5mL 洗涤乙醚层，反复几次，收集乙醚，经无水硫酸钠脱水，微温除乙醚。残渣加（1＋1）氨水 1mL 溶解，水浴蒸干，加水 2mL 溶解，取 1mL 于试管中，加 1%三氯化铁溶液，观察试管中颜色变化。判定：如试管中颜色呈肉色沉淀，疑有苯甲酸，如产生深紫色疑有水杨酸。本法为定性检测。同时做正常乳对照试验。确证试验：取残渣溶于少量热水中，冷后加 5 滴 10%亚硝酸钾溶液，5 滴 50%乙酸， 1 滴 10%硫酸铜溶液，混匀，煮沸 30 分钟，放置片刻，如有水杨酸时呈血红色，苯甲酸不显色。 5、乳新鲜度的快速检验——煮沸和酒精试验、乳新鲜度的快速检验 1）煮沸试验：取乳样 10ml 于试管中，置沸水浴中加热 5 分钟后观察，不得有凝块）煮沸试验：或絮片状物产生，否则表示乳不新鲜，且酸度大于 26°T。 2）酒精试验：在试管内用等量的中性酒精和牛乳混合（1-2ml））酒精试验：，振摇后不出现絮片的牛乳，其酸度低于 18°T，为新鲜乳。如出现絮片，表明酸度高于 18°T，为次鲜或变质乳或搀入了陈乳。

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